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Modification de la norme nf T 90-431
- Recherche et dénombrement des Legionella spp et Legionella pneumophila – Méthode par ensemencement direct et après concentration par filtration sur membrane ou centrifugation.
- Version du 1er novembre 2014 : applicable dans les 6 mois après la parution
Prélèvement et transport
- Volume de prélèvement : min 500mL (v.2003 : 1L)
- Transport en enceinte isotherme SANS glace (v.2003 : sous glace, avec contrôle de la T° à (5±3)°C à partir de 12h après prélèvement)
TRAITEMENT DES ECHANTILLONS
NF t90-431 - 2003 | NF T90-431 - 2014 |
EMN = eau propre | |
1 ensemencement direct 1 ensemencement en direct de 0,2mL de 0,2mL |
1 ensemencement direct 1 ensemencement en direct de 0,2mL de 0,2mL |
1 concentration après filtration 1 concentration après filtration sur membrane puis traitements :
|
1 concentration après filtration sur membrane de 10mL 1 concentration après filtration sur membrane de 100mL |
Incubation à (36±2)°C | Incubation à (36±2)°C |
Lecture des résultats
- 2 lectures intermédiaires à partir du 3e jour
- lecture définitive 8-11 jours (v.2003 8-10j)
Dénombrement positif et confirmation
- Repiquage et incubation à (36±2)°C entre 2 et 4 jours
Limite de détection et limite de quantification
NF t90-431 - 2003 | NF T90-431 - 2014 |
limite de détection
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limite de détection
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limite de quantification
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limite de qantification
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Exemple de calculs selon NF T90-431 - 2014
- Présence de colonies à partir de la filtration de 100mL uniquement :
- Résultat = nbre de colonies * 10 UFC/L (n’’<100) - Présence de colonies à partir de la filtration de 10mL uniquement :
- Résultat = nbre de colonies * 100 UFC/L (n’<100) - Présence de colonies à partir de l’ensemencement direct :
- Résultat = nbre de colonies * 5000 UFC/L (n<150)
Expression des résultats :
- Résultats provisoires obtenus lors des lectures intermédiaires :
- Identification confirmée, numération provisoire - Résultats définitifs confirmés obtenus lors de la lecture définitive
Legionella spp < 10 UFC/L dont Legionella pneumophila < 10 UFC/L
Conclusion - retour d’expérience – labo agréé
Volume annuel d’analyse pour recherche des légionelles :
1000 échantillons EMN (2650 au total)
Mise en application de la NF T90-431 (2014) : 04/05/15
Résultats NF t90-431(2003) : 295 | Résultats NF T90-431(2014) : 700 |
<50 UFC/L : 96,3 % | <10 UFC/L : 91,7 % |
50 UFCL/L : 1,7 % | 10<...<50 UFCL : 8 % |
>50 UFCL/L : 2 % | >50 UFCL : 0,3 % |