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La PCR, biologie moléculaire et innovation
au service de la gestion du risque Legionella

1ère étude d’utilisation simultanée des 2 méthodes sur un parc de tar (tours aéro-réfrigérantes)

81 TAR
- PCR résultats en 48 heures, informatif
- Culture résultats en 10 jours, réglementaire
- 1 seul échantillon par TAR (contrôles inopinés 2004)

Utilisation de la PCR temps réel Legionella lors de contrôles inopinés de 81 TAR
parallèlement à la méthode par culture NF T 90-431.
LEGIONELLA 2005, Chicago, octobre 2005
M. Bernier, A. Senescau, B. Baillet, S. Dupuy, R. Fabre - HYGIDIAG. BIOPOLE Laboratory Toulouse. France

- 42% des installations positives par PCR L. pneumophila vs < 15 % par culture

PCR L. pneumophila et tour aéro-réfrigérante (TAR )

Anticipation et gestion du risque sanitaire, un outil au service de l’exploitant
Les résultats de la PCR L. pneumophila sont prédictifs des résultats des analyses réalisées selon la norme NF T 90-431
- PCR négative Culture négative
- PCR < 1 000 UG/l Risque de culture positive faible
- PCR > 25 000 UG/l Risque de culture positive forte établies à l’annexe II.
98,8% des installations positives par PCR Legionella species vs < 20 % par culture
Aucune corrélation entre les 2 méthodes pour le paramètre Legionella species 

PCR Legionella spp. et tour aéro-réfrigérante

Pas de corrélation avec la norme NF T 90-431
Mesure le potentiel de prolifération des bactéries du genre Legionella dans une installation
Mise en évidence de la complémentarité des 2 méthodes
Dans l’état actuel de nos connaissances la PCR Legionella Totale (spp.) n’est pas un indicateur de risque sanitaire pertinent
La PCR Legionella spp est un indicateur pertinent pour:
- la gestion d’opérations de traitement chimique
- le pilotage précis de la maintenance
- l’audit d’une installation

PCR Legionella : ECS , ERP et utilisation

L’utilisation de la PCR XP T 90-471 peut permettre de mettre en place des actions de prévention et d’investigation en complément de la méthode par culture.
- Non réglementaire
- Résultats en moins de 48 heures
- Logistique simplifiée
- Analyse normalisée en avril 2006

Paramètres de suivi microbiologique

Culture NF T 90-431
- Réglementaire
- Interférence avec les biocides et les flores envahissantes
- Résultat définitif > 10 jours
PCR Legionella pneumophila, XP T 90-471
- Valeur prédictive négative
- Sensibilité supérieure à la culture
- Résultat en moins de 48 heures
PCR Legionella species, XP T 90-471
- Paramètre de suivi des actions et des traitements
- Paramètre de différenciation des installations
- Aucune corrélation avec la culture

Avancées et informations échangées plate-forme AFNOR depuis 2007

La PCR est un paramètre performant de suivi des installations
La création d’un étalon national est une priorité
- Standardiser les résultats
- Définir des seuils de décisions
Il faut changer nos habitudes analytiques sur le suivi des Legionella
- La PCR doit être utilisée pour la prévention dès aujourd’hui
Les résultats PCR L. pneumophila sur les ECS sont facilement utilisables
- Corrélation avec la culture
- Valeur prédictive négative
L’utilisation des résultats PCR sur les TAR demande un niveau d’expertise et d’expérience du laboratoire.
- Monitoring des TAR est basé sur la variation des indices de suivi entre 2 échantillons et le niveau de l’indice de Legionella pneumophila

Éléments de discussion

Les analyses ne sont pas la solution aux problèmes de Legionella
- Maintenance, conception
- Validation des traitements
- Fréquence de suivi des installations
Le paramètre Legionella spp en PCR ne doit pas être un paramètre de décision mais un paramètre de suivi et de compréhension des écosystèmes (TAR)
- Aucune corrélation avec culture
- Objective amélioration et effet des traitements
La PCR L. pneumophila permet la gestion du risque et la mise en place de mesure de prévention et d’anticipation
- Valeur prédictive négative
- Sensibilité
- Rapidité

Coordonnées
Mathieu Bernier, IPL santé environnement durables Midi-Pyrénées* Toulouse
Tél. : 05 61 00 73 10 - Cette adresse e-mail est protégée contre les robots spammeurs. Vous devez activer le JavaScript pour la visualiser. - *anciennement LBP-HYGIDIAG